3 история открытия пцр и разработка метода пцр 7 Механизм полимеразной цепной реакции 9



страница12/12
Дата01.10.2017
Размер1.19 Mb.
ТипУчебное пособие
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   12

Гепатит С количественный, 2Ж3012


Исследуемый материал: кровь с ЭДТА. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Наиболее информативным параметром отклика пациента на терапию является уровень вирусной нагрузки. Ее понижение в случае проводимой терапии является явным маркером того, что пациент хорошо реагирует на выбранные лекарственные препараты и их дозу. В случае если проводимая терапия не дает результата и в течение 3-х месяцев не происходит значимого уменьшения уровня вирусной нагрузки (в 100 и более раз), обычно рекомендуется увеличение дозы или смена препарата и схемы лечения.

Количественное определение РНК вируса гепатита С в плазме крови является абсолютно необходимым исследованием при мониторинге течения заболевания и проводимой терапии. Наблюдение уровня виремии во время лечения позволяет врачам более информировано вести пациента, что в свою очередь повышает вероятность благоприятного ответа.

Обнаружение в сыворотке крови РНК HCV является "золотым стандартом" диагностики, свидетельствующим о продолжающейся репликации HCV.

Генотипирование вируса гепатита С, 2Ж3013


Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, биоптат.

Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА).

Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3 поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1.5 мл.

В алгоритм лабораторного обследования гепатита С включено определение генотипа ВГС (1,2,3). Важным прогностическим маркером эффективности противовирусной терапии при инфекции вирусом гепатита С (HCV) является его генотип. Генотип HCV определяет дозу препарата и продолжительность курса лечения. Пациенты, инфицированные ВГС 1-го генотипа, хуже отвечают на противовирусное лечение препаратами интерферонов, чем пациенты, инфицированные ВГС 2-го или 3-го генотипов. Факторами, обусловливающими эффективность лечения, являются генотипы 2 или 3, низкая вирусная нагрузка и незначительные гистологические изменения при биопсии печени. Для практического врача, принимающего решение о назначении этиотропной терапии, результат теста, определяющего генотип вируса, не менее важен, чем определение репликативной активности HCV и вирусной нагрузки.

С целью выбора эффективной схемы лечения достаточно дифференцировать случаи инфицирования генотипом 1-м («genotype 1») от случаев инфицирования другими генотипами («genotype non-1»), не проводя при этом не только детализацию на уровне субтипов вируса, но и не уточняя к какому генотипу – 2-му или 3-му они принадлежат.

Микоплазма гениталиум, 2Ж3015


Исследуемый материал: мазок урогенитальный, моча, секрет предстательной железы, сперма, синовиальная жидкость. Чаще всего материалом для исследования является соскоб из урогенитального тракта (у женщин из цервикального канала, у мужчин – из уретры), при выборе другого биоматериала, проконсультируйтесь с врачом. У детей: у девочек берут соскоб с вульвы, у мальчиков – мочу.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

M. genitalium (класс молликуты) – самый мелкий из известных в природе свободно живущих микроорганизмов, размер его генома составляет 580 тыс.п. оснований является паразитом человека, колонизирующим слизистые оболочки урогенитального тракта и вызывающим развитие воспалительных процессов. M.genitalium вызывает слизисто-гнойный цервицит в отсутствие N.gonorrhoeae и C.trachomatis. При этом клинические проявления цервицита, вызванного M.genitalium практически не отличаются от цервицита хламидийной этиологии. Кроме того, было показана связь M.genitalium с воспалительными заболеваниями верхних отделов органов репродукции женщин. M.genitalium была обнаружена в биопсийном материале трубного эпителия при остром сальпингите у женщин. Инфицирование M.genitalium слизистой эндометрия сопровождается клинической и морфологической картиной острого эндометрита.

У мужчин M.genitalium является этиологическим агентом острого и хронического уретрита, при этом в отличие от уреаплазм практически не встречается у здоровых людей. Более того, уретрит, вызванный M.genitalium, протекает в манифестной форме чаще, чем хламидийный уретрит. По данным разных авторов доля уретритов, вызванных M.genitalium, составляет от 10 до 25%.

Диагностика M.genitalium невозможна с использованием методов, традиционно применяемых для выявления других возбудителей ИППП – микроскопии, вследствие чрезвычайно малых размеров возбудителя; бактериологического посева, вследствие низкой скорости деления клеток микоплазм и высоких требований к составу сред; ИФА, вследствие того, что M.genitalium обладает низкими иммуногенными свойствами; а кроме того несет родовые антигены, встречающиеся у других представителей молликут, колонизирующих человеческий организм. В связи с этим единственными доступными методами лабораторной диагностики инфекции, вызванной M.genitalium, являются методы амплификации нуклеиновых кислот

В отличие от других микоплазм и уреаплазм M.genitalium практически не встречается среди клинически здоровых лиц. В настоящее время M.genitalium рассматривается, как безусловно-патогенный микроорганизм, являющийся самостоятельным этиологическим агентом воспалительных заболеваний органов репродукции человека.

ЦМВ, 2Ж3019


Исследуемый материал: кровь, соскобы (мазки) со слизистых оболочек урогенитального тракта, осадок клеток первой порции утренней мочи, биоптаты внутренних органов, мокрота, спинномозговая жидкость, слюна, грудное молоко, бронхоальвеолярный лаваж. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Возбудитель цитомегаловирусной инфекции (ЦВМ) принадлежит к семейству герпесвирусов 5-го типа. Вирус имеет сродство к ткани слюнных желез и при локализованных формах обнаруживается в этих железах. Заражение цитомегаловирусом происходит в быту: воздушно-капельным и контактным путем, половым путем, при переливании крови и трансплантации донорских органов, трансплацентарным путем, инфицирование ребенка в послеродовом периоде через грудное молоко от больной матери.

Наиболее часто ЦМВ-инфекция проявляется как:

ОРВИ, бронхиты, "беспричинные" пневмонии, плохо поддающиеся антибиотикотерапии. В этом случае больные жалуются на слабость, общее недомогание, быструю утомляемость, головные боли, насморк, воспаление и увеличение слюнных желез, с обильным отделением слюны и белесоватыми налетами на деснах и языке. Генерализованная форма ЦМВ-инфекции с поражением внутренних (паренхиматозных) органов. Наблюдается воспаление печеночной ткани, надпочечников, селезенки, поджелудочной железы, почек. Поражение органов мочеполовой системы у мужчин и женщин проявляется симптомами хронического неспецифического воспаления.

Нередки поражение сосудов глаза, стенок кишечника, головного мозга и периферических нервов.

Патология беременности, плода и новорожденного. Вероятность заражения ребенка цитомегаловирусом достаточно высока, если инфицирование матери произошло во время беременности. Однако наступление беременности с уже имеющейся латентной инфекцией не всегда приводит к заражению плода. У таких женщин заражение плода может произойти только при обострении латентной инфекции с развитием вирусемии. ЦМВ – инфекция новорожденных может стать причиной желтухи, увеличения печени и селезенки, кровоизлияний во внутренние органы, различных симптомов поражения нервной системы.

Возбудителем цитомегаловируса Cytomegalovirus hominis, попадая в организм один раз, остается там навсегда.

Вирус Эпштейна-Барр, 2Ж3020


Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Вирус Эпштейна-Барр (EBV) принадлежит к семейству герпесвирусов 4 (Human herpesvirus HHV- 4). EBV — острое вирусное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением зева, лимфатических узлов, печени, селезенки и своеобразными изменениями состава крови. Вирус относится к ДНК-содержащим лимфопролиферативным вирусам. Вирус Эпштейна-Барр является причиной инфекционного мононуклеоза, гепатита, волосистой лейкоплакии, синдрома Стивенса – Джонсона. С этим вирусом также связывают развитие лимфомы Беркитта – рака лимфоузлов и носоглотки. Лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина). ЭБВ может быть маркером имеющегося первичного иммунодефицита.

Источником инфекции являются больной человек, в том числе со стертыми формами болезни, и вирусоноситель. Возбудитель передается воздушно-капельным путем, возможен контактный, алиментарный и трансфузионный пути передачи.

Вирус герпеса 1-го и 2-го типов, 2Ж3021


Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, отделяемое везикул (пузырьковых высыпаний), спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Вирус герпеса 1-го типа практически идентичен вирусу герпеса 2-го типа. Тип болезни – генитальный герпес, или так называемая «простуда» на губах – зависит не от типа самого вируса (ВПГ-I или ВПГ-II), который находится в организме человека, а от того места, где он проживает. В большинстве случаев (80–85%) половой герпес вызван вирусом герпеса II типа (ВПГ-II). В 15–20% генитальный герпес вызван вирусом герпеса I типа (ВПГ-1). После инфицирования вирус попадает в "депо". Если речь идет о «простуде» на губах, то этим депо становится тройничный ганглий, который расположен в полости черепа – «верхнее депо». Во время рецидива вирус выходит по нервам от тройничного ганглия, идет к коже лица, подбородка, ушей, лба, слизистой рта и десен, губ и т.д. В этих местах и возможны рецидивы. При генитальном герпесе «депо» вируса находится в крестовых ганглиях – «нижнее депо» вируса. При рецидиве вирус по нервам от крестцового ганглия спускается к коже гениталий, ягодиц, бедер, лобка, слизистой влагалища, уретры. Внутри организма человека переход вируса из «верхнего депо» в «нижнее» невозможен.

Учитывая, что симптоматика герпеса может быть схожа с симптоматикой других инфекций, передающихся половым путем, одной из главных задач является идентификация заболевания. Для диагностики ВПГ используют следующие методы исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР), выявление антигенов ВПГ.

Путь заражения: половой, воздушно-капельный (очень редко), при первичной инфекции возможна передача вируса через плаценту. С помощью ПЦР можно определить 1-м или II-м типом вируса произошло заражение.


Вирус герпеса 6-го типа, 2Ж3022


Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собирается утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

В середине 80-х годов группа герпесвирусов пополнилась вирусом герпеса человека 6-го типа. Он был выделен из лимфоцитов крови больных, в связи, с чем получил название лимфотропного. ВГЧ-6 репродуцируется в Т-, В-лимфоцитах и макрофагах, в большей степени поражая Т-лимфоциты. Имеет тропизм к глиальным клеткам. Инфекция распространяется воздушно-капельным путем. ВГЧ-6 постоянно обнаруживают в носоглоточной слизи и слюне инфицированных лиц. Возможно заражение при гемотрансфузиях, трансплантации органов, при использовании медицинских инструментов, контаминированных вирусом. Имеются сообщения о случаях заражения наркоманов, а также медицинских работников при случайных уколах иглой, содержащей кровь инфицированных или больных.

Исследования показали, что инфекция широко распространена среди людей. От 60 до 96% здоровых взрослых являются серопозитивными. У подавляющего большинства зараженных ВГЧ-6 формируется латентная инфекция. С этиологической ролью ВПГ-6 связывают заболевания и клинические синдромы: острого лихорадочного заболевания, развитие внезапной экзантемы, мононуклеозоподобного синдрома. С ВГЧ-6 связывают развитие синдрома хронической усталости, для которого характерны: острое гриппоподобное начало с повышением температуры до 38°С, боли в горле, небольшое увеличение шейных, затылочных, подмышечных лимфоузлов, необъяснимая генерализованная мышечная слабость, мигрирующие миалгии, артралгии, расстройства сна, раздражительность, повышенная физическая утомляемость с последующей длительной усталостью. Для диагностики этой патологии используют молекулярно-биологические (ПЦР) и иммунохимические (ИФА) методы диагностики.

Токсоплазмы гондии, 2Ж3023


Исследуемый материал: кровь, соскоб, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость (ликвор). Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Токсоплазмоз – паразитарное заболевание человека и животных, вызываемое токсоплазмами. В эпителии тонкого кишечника кошки и других кошачьих токсоплазмы проходят сложный жизненный цикл, завершающийся образованием мелких яйцевидных ооцист. Они могут вызывать у человека и животных тяжелое заболевание – токсоплазмоз. Источник инфекции – различные виды (свыше 180) домашних и диких животных (собаки, кошки, кролики, хищники, травоядные, грызуны и др.) и птиц. Заражение человека происходит при употреблении мясных продуктов и яиц не прошедших достаточную термическую обработку. Не исключена возможность заражения при попадании возбудителя на слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы, трансмиссивным и другими путями. Наблюдается и внутриутробное заражение. Токсоплазмоз протекает с субфебрильной температурой, головной болью, увеличением лимфоузлов и печени, понижением работоспособности, может сопровождаться поражением глаз, сердца, нервной и других систем и органов. Заболевание может протекать и в латентной форме. Для распознавания используют методы серодиагностики и внутрикожную аллергическую пробу, ПЦР диагностика позволяет определить наличие в организме живого паразита по присутствию его ДНК в клиническом образце.


Энтеровирус, 2Ж3027


Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, ликвор, соскоб. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Соскоб или спинномозговую жидкость (0,2 мл) поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.

Энтеровирусы относятся к семейству пикарновирусов. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений — от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Энтеровирусы кислотоустойчивы и относительно стабильны при низких значениях рН (<3,0), что позволяет им выживать в кислой среде желудка, а отсутствие оболочки делает их резистентными к действию желчных кислот. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений: от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Первичный очаг размножения локализован в эпителии рта, глотки, тонкой кишки, а также в лимфоидных тканях кольца Пирогова-Вальдейера и пейеровых бляшках. Возможно вторичное проникновение вируса из эпителия слизистых оболочек в лимфоидные ткани и кровоток (первичная вирусемия), а затем в различные органы и ЦНС. Основной путь передачи – фекально-оральный, возможен контактный путь передачи возбудителя с отделяемым носоглотки и через воду загрязненных водоемов.



Для энтеровирусной инфекции характерна сезонность с подъемом заболеваемости в летние месяцы. Инфицированный человек выделяет вирус в течение пяти недель. Естественный хозяин вируса – человек. Сложность этиологической расшифровки ИФА методом обусловлена значительным числом серологических вариантов. Этот метод недостаточно чувствителен и специфичен, требует исследования парных сывороток. Перспективным направлением лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции является прямой метод выявления вируса с помощью ПЦР.

Гепатит В количественный, 2Ж3031


Исследуемый материал: кровь с ЭДТА. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА).
Примечание.

Прием материала на исследование в Иркутском диагностическом центре производится с 800 до 1500. Обращаться в регистратуру лабораторного отдела.


Каталог: asld -> docs -> Obzor
Obzor -> Методические рекомендации Иркутск, 2010 ббк 53. 45+51. 1(2)28 С42 Утверждено Методическим советом игиува
Obzor -> Список сокращений
docs -> Правила менеджмента качества клинических лабораторных исследований medical laboratory technologies. Requirements for quality of clinical laboratory tests
docs -> Эпителиальные клетки плазматические клетки
Obzor -> Постановление 30 мая 2003 г. N 105 о введении в действие санитарно-эпидемиологических правил и нормативов санпин 1333-03
Obzor -> Что нам даёт определение специфических IgG-антител к пищевым аллергенам


Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   12


База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2017
обратиться к администрации

    Главная страница