Биологические пробы на животных. Внутрикожное заражение морских свинок фильтратом бульонной культуры дифтерийных бактерий вызывает у них некроз в месте введения. Наиболее характерным проявлением действия токсина является поражение надпочечников.
Заражение куриных эмбрионов - дифтерийный токсин вызывает их гибель.
Заражение культур клеток - дифтерийный токсин вызывает отчетливый цитопатический эффект.