Методы лабораторных исследований, используемые при диспансеризации рабочих с вредными условиями труда


Фотометрическое определение ртути в моче



Скачать 111.16 Kb.
страница3/3
Дата05.05.2016
Размер111.16 Kb.
ТипМетодические рекомендации
1   2   3

Фотометрическое определение ртути в моче
(модификация И.С. Климец)
Метод основан на экстракции бензолом и фотометрировании сине-фиолетового ассоциата,

образованного анионным йодидным комплексом ртути с катионом кристаллического фиолетового.


    Оборудование  и  реактивы.  Делительные  воронки  на  300  мл.
Центрифуга на 3000 об./мин. Фотоэлектроколориметр. Серная кислота,
выдерживающая  пробу  Саваля,  1,8  н.  раствор  (4,76  мл  H SO ,
                                                             2  4
дистиллированной  воды до 1 л). Калия йодида 0,1 М раствор (16,6 г
KJ  на  1  л  воды).  Кристаллический  фиолетовый, 0,001 М раствор
(0,407 г на 1 л воды), перекристаллизованный из метилового спирта.
Основной  стандартный  раствор ртути, содержащий 0,1 мг Hg в 1 мл;
приготовляют растворением 0,1341 г сулемы, 0,1243 г ртути сульфата
или 0,2265 г йодида ртути в 1 л раствора Люголя (30 г йодида калия
и 2,5 г йода в 1 л воды). Бензол.
Определение. В делительную воронку наливают 100 мл мочи из суточного количества,

подкисляют 10-ю мл серной кислоты 1,8 н., добавляют 2 мл 0,1 М йодида калия, 1 мл 0,001 М

раствора кристаллического фиолетового, 87 мл дистиллированной воды и 6 мл бензола. Содержимое

воронки встряхивают 1 мин. Водную фазу (нижний слой) отбрасывают через 2 - 3 мин.

Органическую фазу сливают в пробирку с пробкой, центрифугируют 10 мин. при 2000 об./мин.,

фотометрируют на ФЭК-56 при светофильтре N 8 в кювете толщиной 0,5 см против бензола.

Результат отсчитывают по калибровочному графику.
Построение калибровочного графика. Используется моча, из которой предварительно удалена

ртуть (см. осаждение ртути в виде протеината - С.Л. Гинзбург). Декантируют надосадочную

жидкость и в ней проводят определение ртути по вышеприведенной методике в 4-х пробах после

добавления в каждую соответственно 0,2; 0,4; 0,6 и 0,8 мл рабочего стандартного раствора ртути

(концентрация 10 мкг на 1 мл). По результатам определения строят график. В диапазоне

концентраций от 2 до 10 мкг/мл график представляет собой прямую линию, т.е. отражает прямую

зависимость между оптической плотностью исследуемого раствора и концентрацией ртути в пробе.
Пример расчета: найденное по калибровочному графику количество ртути в пробе разделить на
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
1000 для перевода мкг в мг, умножить на 10 для пересчета на 1 л мочи.
Е = 0,05; количество ртути в пробе = 1 мкг. Отсюда:
    1,0 x 10
    -------- = 0,01 мг/л.
      1000
Модифицированное определение марганца
в моче (С.Я. Михлин)
Метод основан на соосаждении марганца из мочи совместно с фосфатами при резком

подщелачивании среды, окислении бесцветного двухвалентного марганца в окрашенную соль

марганцевой кислоты и последующем фотометрировании раствора.
    Оборудование   и  реактивы.  Вытяжной  шкаф,  муфельная  печь.
Центрифуга  на  3000  об./мин.  Водоструйный  насос. Водяная баня.
Аммиак,  25%  раствор.  Серная  кислота,  5  н. раствор. Фосфорная
кислота,  85%  раствор.  Серебра нитрата  3,4% раствор. Персульфат
аммония  хч.  Стандартный раствор марганца: 1 л основного раствора
содержит  5,04  MnO  x 7H O или 2,74 безводного MnO  (концентрация
                   4     2                         4
марганца  1  мг/мл).  Рабочий  раствор готовят десяти-, стократным
разведением  основного  серной  кислотой 5 н. (содержание марганца
0,1 или 0,01 мг/мл).
Определение. В 500 мл мочи из суточного количества осаждают фосфаты с помощью 50 мл 25%

раствора аммиака. После перемешивания пробу оставляют до следующего дня для отстаивания

осадка. Надосадочную жидкость декантируют или отсасывают водоструйным насосом. Осадок

количественно переносят с помощью остатка мочи в широкую центрифужную пробирку и

центрифугируют 20 мин. при 2000 об./мин. Надосадочную жидкость сливают, осадок взмучивают в

дистиллированной воде и снова центрифугируют. Промывание осадка повторяют до исчезновения

запаха аммиака, затем растворяют его в 5 мл горячей 5 н. серной кислоты, через 30 мин. пропускают

через фильтр Шотта и собирают в фарфоровую чашку для выпаривания. Фильтр дополнительно

промывают в 2 мл той же кислоты и соединенные растворы выпаривают на электроплитке досуха, а

затем сжигают в муфельной печи при 500 °C. Остывший белый полностью минерализованный

осадок растворяют в течение 30 мин. в 1 мл горячей серной кислоты, раствор сливают в

градуированную центрифужную пробирку. Фарфоровую чашку ополаскивают 1 мл 85% раствора

фосфорной кислоты и переносят в ту же пробирку. Доводят объем пробы серной кислотой до 5 мл. В

другую, контрольную, градуированную пробирку вносят 3,9 мл 5 н. серной кислоты и 0,1 мл рабочего


Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
раствора марганца (концентрация 0,01 мг/мл) и 0,1 мл 85% фосфорной кислоты. В обе пробирки

вносят по 3 капли 3,4% серебра нитрата, по 0,3 сухого персульфата аммония и погружают на 30 мин.

в кипящую водяную баню. Пробу остужают и определяют, содержится ли в ней марганец, по

появлению розового окрашивания (просматривают пробу сверху вниз). Отсутствие окраски указывает

на отсутствие марганца. В контрольной пробирке появляется характерное розовато-фиолетовое

окрашивание; при окраске исследуемой пробы в более интенсивный, чем в контроле, цвет готовят

шкалу из ряда разведений раствора марганца (аналогично приготовлению шкалы для определения

ртути). Общий объем рабочего раствора марганца и серной кислоты должен быть при этом всегда

равен 4 мл. Для пересчета содержания марганца в 1 л мочи полученный результат удваивают.
Норма. У здоровых людей, профессионально не соприкасающихся с марганцем, его

концентрация в моче не должна превышать 0,01 мг/л.


Определение фтора в моче (модификация Е.А. Рык)
Метод основан на потенциометрическом измерении ЭДС, зависящей от концентрации ионов

фтора в моче, с помощью ионоселективного фторидного электрода. Обязательным условием является

предварительная хроматографическая обработка мочи на ионообменной смоле для удаления всех

органических компонентов, "отравляющих" электрод и снижающих его чувствительность.


Оборудование и реактивы. Фторидный ионоселективный электрод ЭФ У-1 (индикаторный).

Хлорсеребряный или каломельный электрод сравнения. Солевой мостик (стеклянная трубка

диаметром 10 мм, заполненная 1% раствором агар-агара на насыщенном растворе аммония нитрата).

Регистрирующее устройство (pH-метр ЛПУ-1, соединенный с потенциометром, как "О"-индикатор,

или цифровой вольтметр постоянного тока Щ-1413). Схема установки для потенциометрического

измерения собирается по общеизвестным правилам. Хроматографические колонки диаметром 10 мм

и высотой 500 мм, 2% раствор азотной кислоты. Ионообменная смола ЛВ-17 x 6. Основной

стандартный раствор фтора (100 мг/мл: 222,22 мг NaF хч в 1 л дистиллированной воды, в

полиэтиленовой посуде).
Подготовка смолы и хроматографической колонки. Один объем смолы заливают тремя

объемами дистиллированной воды на 48 ч, меняя воду не реже двух раз в сутки. После последнего

слива воды смолу заливают 2% раствором азотной кислоты и выдерживают в ней сутки. Смолу

переносят в предварительно ополоснутую азотной кислотой хроматографическую колонку, на дно

которой положен слой стеклянной ваты высотой 10 мм. Уровень загрузки колонки смолой - около

250 мм. При всех процедурах необходимо следить, чтобы над поверхностью смолы был слой

жидкости не менее 10 мм. Загруженную колонку промывают 30 мл 2% раствора азотной кислоты со

скоростью 25 капель в мин., затем с той же скоростью - дистиллированной водой до pH 4,4. Для

загрузки одной колонки требуется около 15 г сухой смолы.
Определение. Рекомендуется анализировать свежесобранную мочу. При необходимости мочу

собирают и хранят в полиэтиленовой посуде с добавлением нескольких капель фенольной воды.


10 мл мочи разводят дистиллированной водой в 5 раз, доводят pH до 5,0 добавлением 0,1 н.

раствора соляной кислоты, пропускают через подготовленную колонку со скоростью около 25 капель

в мин. Затем колонку промывают 50 мл дистиллированной воды и элюируют фтор пропусканием 30

мл 3% раствора нитрата кальция с той же скоростью. Первые 25 мл элюата собирают в

полиэтиленовый стаканчик емкостью 30 - 50 мл. После окончания элюции колонку промывают 30 мл

дистиллированной воды, 30 мл 2% раствора азотной кислоты и повторно дистиллированной водой


Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
до pH 4,4. После этого колонка пригодна для повторного использования.
В полиэтиленовый стаканчик с элюатом опускают фторидный электрод и один конец солевого

мостика. Другой его конец и электрод сравнения погружают в стеклянный стаканчик, заполненный

насыщенным раствором нитрата аммония. В этом растворе следует хранить электрод в нерабочем

состоянии. Через 10 мин. после подключения электродов к регистрирующему устройству и

помешивания стаканчика проводят отсчет показаний прибора в вольтах. Содержание фтора

определяют по калибровочному графику. Найденную концентрацию умножают на 2,5 (разведение

пробы при элюции).
Построение калибровочного графика. Из основного стандартного раствора фторида натрия,

разбавляя его 3% раствором нитрата кальция, готовят ряд разведений с концентрацией 0,1, 0,5, 1,0,

2,0, 5,0, 10,0, 25,0, 50,0 и 100,0 мг/л фтора. На основании данных потенциометрического

исследования этих растворов строят полулогарифмический график, на котором по оси ординат

откладывают показания измерительного прибора (в), а по логарифмической оси абсцисс -

концентрацию фтора (мг/л). Зависимость между величиной ЭДС и логарифмом концентрации фтора

прямолинейная.
Норма и оценка результатов. Концентрация фтора в моче здоровых людей, профессионально не

соприкасающихся с его соединениями, полученная данным методом, колеблется от 0,33 до 1,5 мг/л.

Среднее содержание фтора при этом составляет 0,80 +/- 0,07 мг/л. Диагностическое значение имеют

лишь величины, превышающие 1,5 мг/л (79 мкмоль/л).


Определение фенола в моче (Тайсингер и соавт.)
Метод основан на отгонке фенола с паром из гидролизованной с помощью серной кислоты

мочи, который при взаимодействии с реактивом Джиббса образует окрашенное соединение синего

цвета. Количественное определение фенола проводится колориметрически.
    Оборудование  и  реактивы.  Стеклянная перегонная установка на
шлифах   с  внешним  парообразователем.  Фотоколориметр  ФЭК-Н-57.
Серная  кислота хч, концентрированная. Боратно-карбонатный буфер с
pH  10,5  (10,5  г  Na CO   x 10H O и 2,8 г безводной буры Na B O
                      2  3       2                           2 4 7
растворяют  в  0,5  л  воды). Фенольный  реактив Джиббса (основной
спиртовый раствор, содержащий 15 мг  2,6-дибромхинонхлоримида в 10
мл  96°  спирта).  Этот  раствор сохраняется на холоде и в темноте
двое  суток.  Рабочий  раствор  готовят  десятикратным разведением
основного  бидистиллированной  водой (раствор нестоек, его следует
готовить   перед   употреблением).  Основной  стандартный  раствор
фенола: свежеприготовленный раствор перегнанного фенола, 500 мг/л;
рабочий раствор готовят из основного с содержанием фенола 10 мг/л.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Определение. 5 мл мочи, подкисленной 0,5 мл концентрированной серной кислоты, помещают

в среднюю колбу перегонной установки и перегоняют ее содержимое с водяным паром, получаемым

в парообразователе, со скоростью 5 - 10 мл/мин. Из собранных в мерный цилиндр 50 мл дистиллята

10 мл переносят в мерную колбу на 25 мл, добавляют 2,5 мл буферного раствора, 1 мл фенольного

реактива Джиббса и доводят объем бидистиллированной водой до метки. Через час пробу

фотометрируют при оранжево-красном светофильтре N 7 против холостой пробы, содержащей все

компоненты, кроме мочи. Предварительную калибровку проводят, исходя из рабочего раствора

фенола, по шкале, содержащей в 25 мл 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 и т.д. мл этого раствора, 2,5 мл буферного

раствора и 1 мл фенольного реактива.
Норма и оценка результатов. Фенол является нормальным продуктом обмена в организме ряда

белков, поэтому в небольших количествах он всегда присутствует в крови и моче. Поскольку бензол,

попавший в организм извне, в значительной мере окисляется до фенола, его экскреция с мочой

возрастает. У людей, профессионально не соприкасающихся с бензолом, за сутки выводится в

среднем 8,2 мг фенола. Средняя концентрация его в моче здоровых людей равна 11,3 +/- 1,0 мг/л (120

+/- 11 мкмоль/л).


Определение фенола в моче может служить в качестве коллективного экспозиционного теста,

повышенные результаты которого указывают на недопустимое загрязнение воздуха рабочей зоны



производственных помещений парами бензола или фенола.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Каталог: law -> trud-i-zanjatost-naselenija -> trud
trud -> Министерство здравоохранения и социального развития
trud -> 19 августа 2010 г. N 16-1/10/2-7232
trud -> Организация акушерско-гинекологической помощи женщинам, работающим на промышленных предприятиях
trud -> Критерии профотбора в ведущие профессии горнорабочих угольной промышленности с учетом действующих производственно профессиональных факторов
trud -> Оздоровление условий труда и профилактика профессиональных заболеваний на золотодобывающих россыпных шахтах и шлихообогатительных фабриках крайнего севера
trud -> Определение грамотрицательных потенциально патогенных бактерий возбудителей внутрибольничных инфекций методические рекомендации
trud -> Методические рекомендации клиника, диагностика, критерии врачебно-летной экспертизы и профилактика хронической сенсоневральной


Поделитесь с Вашими друзьями:
1   2   3


База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2017
обратиться к администрации

    Главная страница