Технология получения фосфоробактерина

Культуру Bac.megaterium var.phosphaticum на всех стадиях производственного культивирования выращивают глубинным способом. Исходную лиофильно высушенную культуру размножают на одной из сред следующего состава (в %):

Культивирование проводят в ферментере в строго асептических условиях при постоянном перемешивании и принудительной аэрации до стадии образования спор. Основные параметры проведения процесса: температура 28-30*с , рН среды 6,5-7,5, длительность культивирования 1,5-2 сут. При выращивании на 1-й среде титр клеток в готовой культуральной жидкости составляет 2,7-3 млрд. спор в 1мл, на 2-й – 4,3млрд. в 1мл.

Полученную в ходе культивирования биомассу клеток отделяют центрифугированием и высушивают в распылительной сушилке при 65-75*С до остаточной влажности 2-3%. Высушенные споры смешивают с наполнителем (каолином). Приготовленный таким образом готовый препарат должен содержать в 1г не менее 8 млрд.клеток. Его расфасовывают по 50 -500г во влагонепроницаемые пакеты и герметизируют.

Фосфоробактерин обладает большей устойчивостью при хранении. Потеря жизнеспособности клеток после 1 года хранения не превышает 20%.[6]

В общем, схему производства можно свести к следующим стадиям:

1. Подбор чистой культуры бактерий и внесение ее в благоприятную среду.

2. Культивирование со значительным наращиванием биомассы.

3. Выделение и выпуск готового продукта.

При промышленном производстве фосфоробактерина приходится сталкиваться с такими факторами, отрицательно влияющими на процесс получения бактериального удобрения, как фаголизис культуры и непрорастаемость спор. Фаголизис культуры объясняют тем, что, с одной стороны, штаммы Bac.megaterium чувствительны к действию бактериофагов и причина фаголизиса – инфицирование культуры извне, а с другой – исходная культура сама по себе является мутагенной, содержит в себе профаг, который в определенных условиях активируется.

В комплексе мероприятий по борьбе с фаголизисом в производстве особое внимание уделяют достижению и поддержанию асептических условий на всех стадиях промышленного культивирования, селекции и отбору устойчивых к фагам штаммов, введению добавок солей органических кислот в среду для выращивания микроорганизма в концентрациях, не оказывающих отрицательного воздействия на культуру (обычно в пределах 0,075-0,1%). [2]

2. Процесс получения фосфоробактерина

Рассмотрим процесс получения более подробно. Весь цикл состоит из 5 этапов, каждый из которых, в свою очередь, подразделяется на несколько шагов.

Схема процесса получения фосфоробактерина в общем виде:

Приготовление инокулята

Приготовление среды

Ферментация

Сушка

Фасовка и выпуск продукта