Тесты для экспрессного определения биологически активных соединений



Скачать 14.36 Kb.
Pdf просмотр
Дата23.09.2018
Размер14.36 Kb.
ТипТесты


30
ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ЭКСПРЕССНОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Н.А. Бызова, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев
Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН, Москва, Россия, dzantiev@inbi.ras.ru
Проведенные исследования направлены на создание тест-систем, основанных на принципе иммунохроматографии - движении пробы и специфических реагентов вдоль пористого мембранного носителя, сопровождающемся формированием детектируемых окрашенных зон. Разработка была осуществлена на примерах лекарственных и наркотических вещества как низкомолекулярных антигенов и клеток микроорганизмов
(Mycobacterium tuberculosis, Legionella pneumophila) как высокомолекулярных.
Получены препараты коллоидного золота и их конъюгаты с антителами; на основании электронно-микроскопических данных охарактеризована структура коллоидных частиц. Определены оптимальные мембранные носители для анализа антигенов различной природы и молекулярной массы. Разработаны протоколы иммобилизации специфических реагентов на мембранных носителях. Установлены условия проведения анализа (концентрации реагентов, характеристики мембран), обеспечивающие достоверное различие окраски индикаторных полос для положительных и отрицательных проб в соответствии с контролируемыми уровнями содержания антигенов. Проведена видеоцифровая количественная характеристика связывания иммунореагентов в ходе анализа. Изучена стабильность иммунохроматографических тест-систем при хранении. Для регистрации результатов мембранного иммуноанализа апробирован портативный фотометр. Осуществлена сравнительная характеристика программного обеспечения для количественной регистрации иммунохимических взаимодействий на мембранных носителях; предложены методики анализа денситограмм и расчета содержания аналита в тестируемых пробах.
Порог детекции наркотических веществ с помощью разработанных тест-систем составляет от 0,05 до 1 мкг/мл (в зависимости от определяемого соединения и диагностически значимого диапазона его содержания), микроорганизмов - 10 3
-10 4
кл./мл. Продолжительность анализа - 7-10 мин. Показана пригодность тест-систем для анализа биоматериала (моча, кровь).
Для иммунохроматографических систем определения шести основных групп наркотических веществ (опиаты, каннабиноиды, амфетамин, метамфетамин, бензодиазепин, кокаин) были проведены медицинские испытания. Показано соответствие результатов анализа с помощью разрабатываемых мембранных тестов и альтернативных методов. Организовано серийное производство данных тест-систем, осуществлена их государственная регистрация.
Разработанные тест-системы могут использоваться как для качественной визуальной диагностики (наличие соединения в пробе или превышение допустимого уровня), так и для количественного определения концентраций с использованием портативного регистрирующего оборудования. Благодаря высокой экспрессности и малой трудоемкости иммунохроматографический анализ является эффективным средством при проведении обследований в лабораторных и внелабораторных условиях, крайне перспективным в ситуации все большего распространения наркомании в обществе.
Работа выполнена при поддержке грантов РФФИ 04-04-08062офи и МНТП
«Вакцины нового поколения и медицинские диагностические системы будущего».

Каталог: bitstream -> 123456789
123456789 -> Значение интерлейкинов в прогрессировании хронической сердечной недостаточности у больных пожилого возраста с ишемической болезнью сердца мохамед Хассан Мохамед Сид Ахмед, асп
123456789 -> Учебное пособие Харьков 2012 министерство здравоохранения украины
123456789 -> Учебное пособие для иностранных студентов высшых фармацевтических учебных заведений и фармацевтических факультетов
123456789 -> Медицинская психология рабочая тетрадь для самостоятельной работы студентов медицинского факультета
123456789 -> Случай абсцедирующего менингоэнцефалита
123456789 -> В., Золотухина Г. А. Облитерирующий бронхиолит у детей
123456789 -> Роль полиморфизма гена Met235Thr ангиотензиногена в патогенезе хронической сердечной недостаточности и ожирения у больных ишемической болезнью сердца
123456789 -> Современные методы и апаратно-программные комплексы для оценки адаптационных возможностей и уровня здоровья организма человека
123456789 -> Учебное пособие для студентов V курса медицинских вузов IV уровня аккредитации Харьков хнму 2009
123456789 -> Практикум по русскому языку для студентов II курса стоматологического факультета


Поделитесь с Вашими друзьями:


База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2017
обратиться к администрации

    Главная страница