Вирус Эпштейна-Барр (вэб) IgG-антитела тест (ebv igg test (ebv igg-check-1)). Vedalab, Франция



Скачать 196.5 Kb.
Дата30.09.2017
Размер196.5 Kb.

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) IgG-антитела тест (EBV IgG Test (EBV IgG-Check-1)). VEDALAB, Франция

Каталожный номер: 76051 Фасовка: 20 тестов/упаковка

Справка

Инфекционный мононуклеоз – острое заболевание, вызываемое вирусом Эпштейна–Барр (EBV, ВЭБ) (1, 2). Наиболее частыми симптомами заболевания являются общая слабость, фарингит, лихорадка, лимфаденопатия, спленомегалия и гепатит (3). Первичными антителами, появляющимися в сыворотке пациента в 85–95% случаев (обычно через 1–3 недели после появления симптомов), являются гетерофильные антитела. Эти антитела относятся главным образом к классу IgM (4, 5) и могут быть обнаружены в сыворотке в течение года с начала заболевания (6).



Предназначение и принцип метода

Качественный иммунохроматографический экспресс-тест для определения специфических IgG-антител к вирусному капсидному и/или специфическому ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр в сыворотке, плазме или цельной крови (7). Метод определения основан на использовании специфического комплекса мышиных моноклональных антител к человеческим иммуноглобулинам класса G, конъюгированных с коллоидным золотом, и иммобилизованного в тестовой зоне мембраны вирусного капсидного антигена (VCA) и EBV-специфического ядерного антигена (EBNA) для определения IgG-антител в тестируемых пробах с высокой специфичностью. При прохождении пробы через слой адсорбента окрашенный конъюгат анти-IgG-антител к связывается с IgG пробы, образуя комплекс антиген–антитело. Этот комплекс связывается с вирусным капсидным антигеном (VCA) и/или EBV-специфическим ядерным антигеном (EBNA) в реакционной зоне тестовой кассеты, образуя пурпурно-розовую полосу. При отсутствии в пробе IgG-антител против VCA или против EBNA окрашенных полос в тестовой зоне не образуется. Вне зависимости от результатов теста несвязанный конъюгат, продолжая продвигаться по слою адсорбента, достигает контрольной зоны, где осаждается с образованием пурпурно-розовой полосы, подтверждающей качественность применяемых в тесте реагентов. Результат теста считывается визуально.



Состав

Тестовые кассеты 20

Одноразовые пластмассовые пипетки 20

Разбавитель во флаконе-капельнице, 5 мл 1

Инструкция 1

Стабильность и хранение

1. Хранить при температуре от 4 до 30°C в герметичной фабричной упаковке.

2. Не замораживать!

3. Тест стабилен до истечения срока хранения, указанного на этикетке.



Меры предосторожности

Данный тест предназначен только для диагностики in vitro и профессионального применения.

При работе с пробами пользоваться защитной одеждой и одноразовыми перчатками.

Не принимать пищу, не пить и не курить в помещении, где выполняется работа с пробами.

При взятии и тестировании проб не прикасаться руками к слизистой оболочке глаз и носа.

Внимательно прочитать инструкцию перед проведением теста.

Не использовать тестовую кассету, если её защитная упаковка повреждена.

Не использовать тестовую кассету с истекшим сроком хранения.

Пробы цельной крови следует тестировать сразу после взятия (в течение 4 часов).

Обезвреживание отходов

Все пробы следует считать потенциально инфекционными. После завершения процедуры тестирования утилизировать пробы следует с осторожностью и только после стерилизации в автоклаве или обработки 0,5–1% раствором гипохлорита натрия не менее 1 часа.



Подготовка реагента

Все реагенты готовы к использованию.



Исследуемые образцы

Сыворотка, плазма или цельная кровь.



Взятие и подготовка проб

1. Настоятельно рекомендуется тестировать пробы сразу после взятия крови.

2. Пробы, содержащие взвесь или осадок, могут дать неверные результаты. Такие пробы перед тестированием необходимо отделить от взвешенных частиц.

3. Для тестирования пробы сыворотки в течение 48 часов после взятия крови образец следует хранить в холодильнике при 2–8°C. Если же тест будет выполняться позже, пробу необходимо заморозить. Замороженные пробы перед тестированием следует оттаять, тщательно перемешать и довести до комнатной температуры. Повторное замораживание проб не допускается.



Процедура тестирования

  1. Довести все пробы, тестовые кассеты и разбавитель до комнатной температуры.

  2. Извлечь тестовую кассету из защитной упаковки, оторвав край упаковки по надрезу.

  3. Пометить тестовую кассету фамилией или кодовым номером пациента.

  4. Набрать пробу (сыворотки или плазмы) в пипетку-капельницу и, держа её вертикально, внести 1 каплю сыворотки или плазмы (25 мкл) в лунку для проб тестовой кассеты. Если тестируется цельная кровь, внести в лунку для проб 2 капли (50 мкл) пробы. Подождать, пока образец полностью впитается.

  5. Внести в лунку для проб по капле 6 полных капель (200 мкл) разбавителя для проб, давая впитываться предыдущей капле.

  6. Наблюдать результаты теста через 10 – 15 минут после внесения пробы.

Интерпретация результатов



Отрицательный: Появляется только одна цветная полоса в контрольной зоне (С).




Положительный на анти-EBNA IgG: Появляются две цветные полосы в тестовой и контрольной зонах.




Положительный на анти-VCA IgG: Появляются две цветные полосы в тестовой и контрольной зонах.




Положительный на анти-VCA и анти-EBNA IgG: Появляются две четко различимые цветные полосы в тестовой зоне и полоса и контрольной зоне.


Неопределённый: Если в контрольной зоне не появилось чёткой цветной полосы, тест считается не прошедшим контроль качества. Следует повторить его через 48 часов со свежим образцом.
Тест на IgG-антитела к ВЭБ следует использовать вместе с тестом на IgM-антитела к ВЭБ.

Интерпретацию результатов нужно делать согласно таблице 1:



VCA-IgG

результат



VCA-IgM

результат



EBNA-IgG

результат



Интерпретация

негативный

негативный

негативный

Никаких признаков инфекции. Контроль через 1-2 недели.

позитивный

позитивный

негативный

1. Острая инфекция или запоздалая анти-EBNA конверсия и персистирующие VCA-IgM (редко). Или падение уровня анти-EBNA и реактивация IgM (редко).

2. Персистирующие VCA-IgM или реактивация IgM после перенесенной ранее инфекции. Это можно проверить при помощи теста на EA-IgG (ранний регуляторный белок).



позитивный

позитивный

позитивный

негативный

позитивный

негативный

Указание на острую инфекцию (очень редко). Контроль через 1-2 недели.

позитивный

негативный

негативный

Недавняя инфекция.

Или снижение анти-EBNA после перенесенной ранее инфекции (сниженный иммунитет).

Это можно проверить при помощи теста на EA-IgG.

Или острая инфекция без обнаруживаемого уровня VCA-IgM (редко).



позитивный

негативный

позитивный

Перенесенная ранее инфекция. Это можно проверить при помощи теста на EA-IgG.

негативный

негативный

позитивный

Давно перенесенная инфекция без анти-VCA IgG (редко)

Характеристики теста

Сравнительное исследование была выполнена с использованием коммерческой панели сывороток, предварительно протестированных референтным методом (иммунофлуоресцентный тест Zeus). Результаты данного теста сравнивались с результатами двух коммерческих ИФА-наборов. Результаты представлены в таблицах 2 (анти-EBNA IgG) и 3 (анти-VCA IgG).



Таблица 2.

Идент. номер

Образец

Результат Zeus IFA

EBV EBNA IgG

Meridian EIA

Inscar EIA

Тест VEDALAB

PME201-01

Сыв-ка

-

-

-

-

PME201-02

Плазма

-

-

-

-

PME201-03

Плазма

-

-

-

-

PME201-04

Плазма

-

-

-

-

PME201-05

Плазма

-

-

-

-

PME201-06

Плазма

-

-

-

-

PME201-07

Плазма

-

-

-

-

PME201-08

Плазма

-

-

-

-

PME201-09

Сыв-ка

-

+*

+*

+*

PME201-10

Плазма

-

-

-

-

PME201-11

Плазма

-

-

-

-

PME201-12

Сыв-ка

80

+

+

-*

PME201-13

Сыв-ка

160

+

+

+

PME201-14

Сыв-ка

-

-

-

-

PME201-15

Плазма

-

+*

+*

-

PME201-16

Сыв-ка

-

+*

+*

-

PME201-17

Сыв-ка

10

-*

-*

+

PME201-18

Сыв-ка

80

+

+

+

PME201-19

Сыв-ка

160

+

+

+

PME201-20

Сыв-ка

320

+

+

+

PME201-21

Сыв-ка

160

+

+

+

PME201-22

Плазма

80

+

+

+

PME201-23

Плазма

20

+

-*

-*

PME201-24

Сыв-ка

-

+*

+*

-

PME201-25

Плазма

-

+*

+*

-

Чувствительность




88,8%

77,8%

77,8%

Специфичность




68,7%

68,7%

93,7%

Общее соответствие




76%

72%

88%

* - Расхождение результатов

Что касается анти-EBNA-антител, то данный экспресс-тест показал три противоречащих результата (образцы №9, 12 и 23) по сравнению с эталонным методом. Однако проба №9 была также определена как позитивная обоими ИФА-методами. Пробы сывороток № 12 и 23, как выяснилось, были отрицательными (данные здесь не приводятся) по IgM-антителам согласно референтному методу, такой же результат показал данный экспресс-тест. Это указывает на предшествующую инфекцию.



Таблица 3.

Идент. номер

Образец

Результат Zeus IFA

EBV VCA IgG

Meridian EIA

Inscar EIA

Тест VEDALAB

PME201-01

Сыв-ка

-

-

-

-

PME201-02

Плазма

-

-

-

-

PME201-03

Плазма

-

-

-

-

PME201-04

Плазма

-

-

-

-

PME201-05

Плазма

-

+*

-

-

PME201-06

Плазма

80

+

+

+

PME201-07

Плазма

640

+

+

+

PME201-08

Плазма

320

+

+

+

PME201-09

Сыв-ка

640

+

+

+

PME201-10

Плазма

160

+

+

+

PME201-11

Плазма

1280

+

+

+

PME201-12

Сыв-ка

1280

+

+

-*

PME201-13

Сыв-ка

2560

+

+

+

PME201-14

Сыв-ка

80

+

+

-*

PME201-15

Плазма

1280

+

+

+

PME201-16

Сыв-ка

160

+

+

+

PME201-17

Сыв-ка

80

-*

+

+

PME201-18

Сыв-ка

640

+

+

+

PME201-19

Сыв-ка

320

+

+

+

PME201-20

Сыв-ка

2560

+

+

+

PME201-21

Сыв-ка

640

+

+

+

PME201-22

Плазма

160

+

+

+

PME201-23

Плазма

160

+

+

+

PME201-24

Сыв-ка

160

+

+

+

PME201-25

Плазма

1280

+

+

+

Чувствительность




95%

100%

90%

Специфичность




80%

100%

100%

Общее соответствие




92%

100%

92%

* - Расхождение результатов

Что касается анти-VCA-антител, то данный экспресс-тест показал два противоречащих результата (образцы №12 и 14) по сравнению с эталонным методом. Другие коммерческие экспресс-тесты тоже показали отрицательные результаты с этими образцами.



а) Чувствительность и специфичность

анти-EBNA IgG

Согласно таблице 2 чувствительность составила:

7 / 9 х 100 = 77,8%

Специфичность составила:

15 / 16 х 100 = 93,7%

анти-VCA IgG

Согласно таблице 3 чувствительность составила:

18 / 20 х 100 = 90%

Специфичность составила:

5 / 5 х 100 = 100%

б) Внутрисерийная воспроизводимость

3 позитивных и 3 негативных пробы (EBNA и VCA) из коммерческих панелей, приведенных в таблицах 2 и 3, были проанализированы с помощью одного лота данного теста. Правильные результаты были в 100% случаев.



в) Межсерийная воспроизводимость

3 позитивных и 3 негативных пробы (EBNA и VCA) из коммерческих панелей, приведенных в таблицах 2 и 3, были проанализированы с помощью трех разных лотов данного теста. Правильные результаты были в 100% случаев.



г) Общая согласованность

Анти-EBNA IgG:

Согласно данным таблицы 2, общая согласованность теста с эталонным методом (ZEUS IFA) составляет 88% и выше согласованности тестов Meridian (76%) или Inscar (72%).



Анти-VCA IgG:

Согласно данным таблицы 3, общая согласованность теста с эталонным методом (ZEUS IFA) составляет 92%, что сопоставимо с результатами тестов Meridian (92%).



Ограничения метода

1. Тест предназначен только для определения антител класса IgG против вирусного капсидного антигена и/или специфических ядерных антигенов вируса Эпштейна-Барр в пробах сыворотки, плазмы или цельной крови.

2. Отрицательный результат теста не может полностью исключить ЭБВ-инфекцию, в редких случаях острой инфекции с положительными анти-VCA IgM.

3. Врач должен оценивать результат теста только в совокупности со всеми данными диагностики и клинической картиной (как и для других диагностических процедур).



Литература

1. Henle G., Henle W. and Diehl V. Relation of Burkitt's tumor-associated herpes-YTPE virus to infectious mononucleosis. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 59: 94-101 (1968).

2. Niederman J-C., McCollum R.W., Henle G. and Henle W. Infectious Mononucleosis. J.A.M.A. 203 no 3: 139-143 (1968).

3. Glade PS, (1973), "Proceedings of symposium on Infectious Mononucleosis, Philadelphia" J.B. Lippincott Co. Pp 1-19.

4. Paul J.R. and Bunnell W.W. The presence OF Heterophile antibodies in infectious mononucleosis. Amer J Med Sci. 183: 90-104 (1932).

5. Davidsohn I. Serologic diagnosis of infectious mononucleosis, J.A.M.A. 108: 289-296 (1937).

6. Evans A.S. Niederman J.C., Canabre LC, West B. and Richards VA. A prospective evaluation of heterophilic and Epstein-Barr Virus – Specific IgM antibody tests in Clinical and Subclinical infectious Mononucleosis : Specificity and sensitivity of the tests and persistance of antibody. J. Infect. Dis. 132 : 546-554 (1975).

7. Waltz, M. Effective testing for Epstein-Barr virus. European Clinical Laboratory. 8 (2000).


Соблюдать температуру хранения Читать инструкцию Не использовать повторно Только для in vitro диагностики

_____________________________________________________________________________________________________________________

Рег. Уд. ФС3 2009/05725 стр. из



ЗАО ДИАКОН, 142290 г.Пущино Моск. обл., ул.Грузовая 1а Тел (495) 9806339, факс (495) 9806679, e-mail: sale@diakonlab.ru

Каталог: files
files -> Вопросы сертификационного экзамена для врачей по специальности «лфк и спортивная медицина»
files -> Рабочая программа составлена в соответствии с Требованиями к содержанию дополнительных профессиональных образовательных программ
files -> Рабочая программа дисциплины Лечебная физическая культура и массаж Направление подготовки 050100 Педагогическое образование
files -> Лечебная физкультура
files -> К рабочей программе дисциплины «Лечебная физкультура и спортивная медицина»
files -> Рабочая программа учебной дисциплины «медицинская реабилитация» цикла Медицинская реабилитация для специальности 310501 «Лечебное дело» по специализации 310501 «Лечебное дело»
files -> Лекции (час) Семинары (час) Самост работа Всего баллов Модуль 1
files -> Влияние мобильного телефона на здоровье человека


Поделитесь с Вашими друзьями:


База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2017
обратиться к администрации

    Главная страница