Лечебно-профилактическая эффективность антибака при аэромонозе, псевдомонозе и флексибактериозе рыб



Скачать 13.13 Mb.
страница1/8
Дата01.05.2016
Размер13.13 Mb.
ТипДиссертация
  1   2   3   4   5   6   7   8


ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»
На правах рукописи
Гончарова Маргарита Николаевна

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ

АНТИБАКА ПРИ АЭРОМОНОЗЕ, ПСЕВДОМОНОЗЕ И ФЛЕКСИБАКТЕРИОЗЕ РЫБ
06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология,

эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Диссертация на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, доцент

Л.И. Грищенко

Москва – 2012



ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение………………………………………………………………………… 4

I. Обзор литературы………………................................................................ 7

1. Особенности эпизоотологии бактериальных болезней рыб…………. 7

1.1. Аэромоноз карповых рыб……………………………………………. 7

1.2. Псевдомонозы………………………………………………………... 16

1.3. Миксобактериозы……………………………………………………... 19


  1. Применение и эффективность антибактериальных препаратов

при бактериальных болезнях рыб………………………………….. 24

3. Препараты фторхинолонового ряда и их характеристика…………. 31

3.1. Применение фторхинолонов при бактериальных

болезнях сельскохозяйственных животных и рыб………………… 37

II. Собственные исследования………………………………………………. 43


  1. Материал и методы исследований…………………………………… 43

  2. Результаты собственных исследований……………………………… 54

        1. 2.1. Эпизоотическая ситуация в рыбхозах Московской

        2. и Рязанской областей по аэромонозу, псевдомонозу

        3. и флексибактериозу…………………………………………………… 54

    1. 2.2. Выделение микроорганизмов и чувствительность

    2. аэромонад, псевдомонад, флексибактерий к фторхинолонам……. 66

    3. 2.3. Фармакокинетика ципрофлоксацина в организме карпов………. 71

      1. 2.3.1. Пероральное введение…………………………………………….. 71

      2. 2.3.2. Обработка в растворе…………………………………………….. 73

      3. 2.3.3. Внутрибрюшинное введение……………………………………… 76

    4. 2.4. Лечебная эффективность Антибака………………………………… 79

    5. 2.5. Профилактическая эффективность Антибака……………………… 82

      1. 2.5.1. Пероральное введение Антибака 100……………………………. 82

      2. 2.5.2. Внутрибрюшинное введение Антибака 500……………………… 89

      3. 2.5.3. Обработка в растворе Антибака 500…………………………… 93

    6. 2.6. Определение токсичности Антибака……………………………… 95

      1. 2.6.1. Внутрибрюшинное введение ципрофлоксацина……………….. 95

      2. 2.6.2. Пероральное введение ципрофлоксацина………………………. 98

      3. 2.6.3. Обработка в растворе Антибака 250…………………………….. 103

    7. 2.7. Производственные испытания лечебно-

профилактической эффективности Антибака………………….... 104

      1. 2.7.1. Производственное испытание Антибака 100 при

      2. аэромонозе карпов………………………………………………….. 104

      3. 2.7.2. Производственное испытание Антибака 100 и Антибака

      4. 250 при флексибактериозе форели и сибирского осетра………… 108

      5. 2.8. Экономическая эффективность от применения

      6. Антибака 100……………………………………………………….. 111

  1. Обсуждение полученных результатов……………………………. 114

III. Выводы………………………………………………………………... 126

IV. Практическое использование полученных результатов………….. 128

V. Рекомендации по использованию полученных результатов………. 128

VI. Список литературы…………………………………………………... 129

VII. Приложения………………………………………………………….. 155
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Одним из факторов, сдерживающих развитие аквакультуры, являются инфекционные болезни. Из них широко распространены и наносят большой ущерб в прудовых и индустриальных рыбоводных хозяйствах различных регионов РФ такие бактериальные заболевания, как аэромоноз и псевдомоноз карпов, миксобактериоз форели и осетровых рыб (П. П. Головин и др. 1998; Н. А. Яременко, А. Н. Мачнев, 2000). Борьба с данными болезнями до сих пор остается весьма актуальной проблемой современного рыбоводства. Несмотря на принимаемые меры, включающие широкое применение антибиотиков, нитрофурановых, сульфаниламидных и других лекарственных средств, эпизоотическая обстановка по ним улучшилась незначительно. Это связано не только с недостаточной комплексностью проводимых оздоровительных мероприятий, но и со снижением лечебной эффективности длительно применявшихся препаратов в результате появления резистентных форм патогенных штаммов возбудителей болезней (H. Shlotfeldt, 1985). Поэтому существует необходимость периодического обновления их ассортимента за счет новых химиотерапевтических средств. К числу наиболее активных препаратов в отношении бактериальных патогенов рыб относится ципрофлоксацин из группы фторхинолонов (J.F.M. Nouws, J.L. Grondel, 1988; R. Palmer et al., 1992). Однако анализ литературных данных показал, что в отличие от человека и теплокровных животных его взаимодействие с организмом рыб практически не изучено. Исходя из этого наиболее актуальным и перспективным является определение основных фармакологических свойств ципрофлоксацина, а также его лечебной эффективности в условиях прудовых и тепловодных рыбоводных хозяйств при бактериальных болезнях рыб различных видов.

Цель и задачи исследований. Цель работы – изучить фармакологические свойства лечебного препарата Антибак и определить перспективы его использования при аэромонозе и псевдомонозе карпов, флексибактериозе форели и осетровых рыб.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:



  1. Изучить эпизоотическую ситуацию в рыбхозах Московской и Рязанской областей по аэромонозу, псевдомонозу и флексибактериозу и оценить перспективы применения в них препарата Антибак.

  2. Определить чувствительность к препарату возбудителей аэромоноза, псевдомоноза и флексибактериоза, выделенных от больных рыб.

  3. Изучить особенности фармакокинетики ципрофлоксацина в организме карпов при разных способах введения препарата, определить дозы и схемы применения Антибака.

  4. Установить лечебно-профилактическую эффективность основных форм препарата при разных способах его введения в организм карпов.

  5. Определить токсические свойства препарата.

  6. Провести производственные испытания Антибака при аэромонозе карпов и флексибактериозе молоди форели и осетровых.

  7. Разработать научно обоснованные рекомендации по применению Антибака при аэромонозе, псевдомонозе и флексибактериозе рыб.


Научная новизна. Впервые дано научное обоснование использования ципрофлоксацина – действующего вещества препаратов группы Антибак для борьбы с бактериальными болезнями рыб. В экспериментальных и производственных условиях установлена антибактериальная активность, изучены особенности фармакокинетики, токсические свойства препарата, определены терапевтические дозы и схемы его применения. На этой основе доказана высокая лечебно-профилактическая эффективность и безопасность применения Антибака 100 и Антибака 500 при аэромонозе, псевдомонозе и флексибактериозе прудовых рыб.

Практическая значимость. Результаты работы позволили рекомендовать Антибак для лечения и профилактики аэромоноза, псевдомоноза карпов и флексибактериоза форели и осетров. Предложены оптимальные дозы и схемы применения препарата при разных способах введения в организм рыб. Результаты научных исследований включены в Наставление по применению препарата Антибак при бактериальных болезнях рыб (2004 г.), в Инструкции по применению Антибака 100 и Антибака 500 для лечения и профилактики болезней бактериальной этиологии товарных рыб (2007 г.), а также в Рекомендации по борьбе с аэромонозом, псевдомонозом и миксобактериозами рыб с использованием препаратов Антибак (2007 г.).
Положения, выносимые на защиту:

1. Лечебная и профилактическая эффективность препаратов группы Антибак при аэромонозе, псевдомонозе и флексибактериозе рыб и безопасность применения их в рыбоводстве.

2. Особенности фармакокинетики ципрофлоксацина в организме рыб.

3. Терапевтические и безопасные дозы и концентрации Антибака, схемы его применения при бактериальных болезнях рыб.




I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Особенности эпизоотологии бактериальных болезней рыб

Бактериальные болезни рыб являются одним из основных факторов, сдерживающих развитие рыбоводства. Из них наиболее распространены такие заболевания, как аэромоноз (краснуха) и псевдомонозы карповых рыб, фурункулез лососевых, миксобактериозы. В список карантинных и особо опасных болезней рыб внесены аэромонозы карповых и лососевых, миксобактериозы лососевых и осетровых (Приказ Минсельхоза России №173 от 29.09.2005 г.).

Несмотря на то, что в настоящее время в РФ показатели распространенности инфекционных болезней рыб по сравнению с инвазионными относительно невысоки (31%), ущерб от них весьма значительный. Так, по данным ветеринарной отчетности практически не уменьшается количество неблагополучных пунктов по аэромонозу карпов и фурункулезу лососевых, эпизодически проявляются вспышки псевдомоноза, сформировались природные очаги некоторых заболеваний (Н.А. Яременко, А.Н. Мачнев, 2000; Н.А. Яременко, В.В. Селиверстов, 2003; Г.М. Павлович, Г.М. Хотева, 2005).

1.1. Аэромоноз карповых рыб

Аэромоноз (краснуха карпов, геморрагическая септицемия, инфекционная брюшная водянка, люблинская болезнь) – бактериальное заболевание, поражающее, главным образом, карпов, сазанов и их гибридов, а также некоторых других рыб семейства карповых, проявляющееся при остром течении бактериальной септицемией, при подостром течении – асцитно-язвенной и при хроническом – язвенной формой болезни.

Заболевание регистрировалось в Европе еще в XVIII веке. Как эпизоотию краснуху впервые описала М. Плен в 1904 г. (M. Plen). По данным W. Schäperclaus (1979) в 20-е годы XX в. болезнь охватила прудовые хозяйства стран Средней и Восточной Европы, а также стала появляться среди природного поголовья сазана в низовьях рек, впадающих в Черное море.

В СССР краснуха карпов впервые была завезена в начале 1930-х г. г. с производителями карпа из Германии и затем быстро распространилась по европейской части страны при перевозках рыбы (В.А. Догель и др., 1939). В течение последующих 20 лет болезнь только по РСФСР была обнаружена в 37 рыбоводных хозяйствах, в четырех озерах и пяти водохранилищах с общей площадью акватории в 84,1 тыс. га. Инфекция была также зарегистрирована в хозяйствах Украинской, Латвийской, Литовской, Молдавской, Узбекской, Киргизской и Таджикской ССР (А.К. Щербина, 1972).

В настоящее время аэромоноз также остается основной проблемой в карповых хозяйствах (прудовых, садковых, бассейновых и др.). Наиболее неблагополучным регионом является Московская (неблагополучны 9 рыбхозов), Калужская, Оренбургская, Ростовская области, Краснодарский и Ставропольский края, Республика Северная Осетия-Алания, Хакасия и другие. В них это заболевание регистрируется многие десятилетия и протекает в основном хронически, периодически обостряясь при завозе посадочного материала (М.Н. Борисова и др., 2007; М.В. Калмыков, В.И. Белоусов, 2009).

По поводу этиологии краснухи долгое время не было единой точки зрения, но большинство ученых считало, что возбудителем болезни является бактерия Aeromonas (Achromobacter) punctata (W. Schäperclaus, 1930; H. Mann, 1939; H. Dombrowski, 1953; W. Wunder, 1953). Советский ученый А. К. Щербина (1939) полагал, что A. punctata всегда можно выделить из пораженных органов рыб, больных краснухой.

Однако при изучении болезни стали накапливаться сведения, что у рыб, больных краснухой, данный возбудитель обнаружить удается не всегда, а бактерии, выделяемые от больных рыб, отличаются большой вариабельностью патогенных свойств. Предположение о вирусной природе этого заболевания впервые был высказано Г.В. Эпштейном, М.А. Пешковым (1934) и Г.Д. Гончаровым (1949) на основании обнаружения телец-включений в эпидермальных клетках больных рыб.

Позднее В.И. Тецу и Г.С. Яковлевой (1962), Е.Ф. Осадчей (1964), J. Tomâšec et al. (1964) удалось обнаружить цитопатогенное действие ультрафильтрата, полученного из тканей больных краснухой карпов, при его действии на культуры клеток почки, сердца, плавников и гонад. Впервые вирус был выделен от карпов с синдромом острой формы инфекционной водянки югославским исследователем N. Fijan et al., (1971), который доказал его этиологическую роль в заболевании и предложил название болезни – весенняя виремия карпа. Параллельно с этим в нашей стране также был выделен вирус, и заболевание получило наименование «весенняя вирусная болезнь» (Н.И. Рудиков с соавт., 1975).

Дальнейшими углубленными исследованиями, проведенными сотрудниками ВИЭВ, было установлено, что под названием «краснуха карпов» описаны заболевания с различной этиологией, имеющие сходную клиническую картину (К.А. Лобунцов, Н.И. Рудиков, 1972, 1979; К.А. Лобунцов, 1974). На основании этого и было выделено 3 самостоятельных болезни: аэромоноз, вызываемый вирулентными штаммами Aeromonas hydrohpila; псевдомоноз, вызываемый бактериями из рода Pseudomonas и весенняя вирусная болезнь, вызываемая рабдовирусом.

Аэромонады – широко распространенные обитатели воды, которые в природе имеют широкий круг биологических хозяев. Среди них имеются варианты, патогенные для морских и пресноводных рыб, земноводных, пресмыкающихся, а также вызывающие оппортунистические токсикоинфекции у теплокровных животных и человека (Л.Н. Юхименко, В.Ф. Викторова, 1979; Э.К. Скурат, Е.И. Гребнева, 1994; Э.К. Скурат и др., 1995; Н.Н. Андросик и др., 1998).

Аэромонады обладают достаточно высокой устойчивостью и могут сохраняться в воде более 247 дней, а в тканях погибших рыб – до 32 суток (D.H. Mac-Carthy, 1977). М.П. Бутко с сотрудниками (1974) установили, что A. punctata остаются жизнеспособными в рыбе при ее посоле (20 - 25% NaCl) 5 – 7 дней, замораживании (-19°С) – 14 дней и гибнут при ее проваривании, обжарке. Aeromonas spp. способны размножаться при пониженных температурах (от -2 до 10°С) в говядине и свинине (K. Krovacek et al., 1992; S.B. Mano et al., 2000) и при этом сохранять факторы вирулентности (D. Mateos et al., 1993; S. Merino et al., 1995).

В процессе изучения аэромонад классификация их видов претерпела ряд изменений. Согласно 9-му изданию Определителя бактерий Берджи (1984) подвижные аэромонады были включены в семейство Vibrionaceae, род Aeromonas и разделены на 3 вида: А. hydrophila, А. caviae, A. sobria. А в последнем издании этого Определителя (1994) видовой состав аэромонад был значительно расширен и дополнен видами: A. eucrenophila, A. schubertii, A. veronii, A. media. Они разделены на 3 группы: группу А. caviae, которая включает А. caviae, A. eucrenophila и A. media; группу А. hydrophila, которая включает А. hydrophila и биогруппу подвижных организмов в составе A. salmonicida; группу A. sobria, которая включает A. sobria, A. veronii и A. schubertii.

В силу вариабельности ферментативных свойств идентификация новых видов аэромонад нередко вызывает затруднение. Так, некоторые авторы считают, что практически все клинические изоляты, идентифицированные как A. sobria, в действительности представляют собой A. veronii (F.W Hickman-Brenner et al., 1987).

Американскими учеными A.M. Carnahan и S.W. Joseph (1993) предложена другая классификация, в основу которой легло изучение подвижных бактерий рода Aeromonas, которые были представлены клиническими вариантами, а также штаммами, выделенными из внешней среды и от животных. В первую группу вошли штаммы А. hydrophila, A. veronii биовар sobria и А. caviae; во вторую группу - A. veronii биовар veronii и A. schubertii. Кроме того, появилась группа из 2-х новых видов: A. jandaei (A.M. Carnahan et al., 1991 а) и чувствительный к ампициллину A. trota (A.M. Carnahan et al., 1991 б).

В настоящее время насчитывается около 16 видов, относящихся к роду Aeromonas. Но систематическое положение таких видов как A. encheleia C. Esteve et al., 1995, A. ichtiosmia R.H.W. Schubert et al., 1991, A. culicicola V. Pidiyar et al., 2002, A. sharmana P. Saha and T. Chakrabarti 2006, A. allosaccharophila A.J. Martinez-Murcia et al., 1992 по мнению ряда авторов является весьма спорным (G.B. Nair, B. Holmes, 2002; C. Esteve et al., 2003; M.J. Saavedra et al, 2006). Также нет единого мнения относительно вида A. enteropelogenes R.H.W. Schubert et al., 1991, который рассматривается G. Huys et al. (2002) как более ранний синоним A. trota A.M. Carnahan et al., 1992.

Выделение вирулентных штаммов аэромонад только от больных рыб указывает на их этиологическую роль при заболевании карпов аэромонозом. В ходе бактериологического исследования двухлетних карпов с признаками острого и подострого течения болезни К.А. Лобунцовым и Н.И. Рудиковым (1972) было установлено, что при переходе острого течения краснухи в хроническое частота выделения вирулентных форм A. punctata из внутренних органов и из язв больных рыб снижается, а от переболевших рыб они или не выделяются совсем, или выделяются слабовирулентные штаммы. Об этом свидетельствуют и данные В.В. Просяной (1972), В.И. Афанасьева с сотр. (1978), которые чаще выделяли вирулентные бактерии от карпов с острой формой болезни, чем с подострой. Причем существенной разницы в видовом составе аэромонад, выделяемых от больных краснухой и здоровых рыб, не обнаружено (В.В. Просяная, П.М. Хуторной, 1983). От толстолобиков с синдромом краснухи также выделяли патогенные для карпов и белых амуров штаммы A. punctata. При этом морфологические и биологические свойства культур, выделенных от больных краснухой толстолобиков и карпов, были идентичны (А.В. Синев и др., 1974; В.И. Афанасьев и др., 1978).

Экспериментальные исследования иностранных авторов (L. Buza, 1975; J. De Figueiredo, J. Plumb, 1977; U. Boulanger et al., 1977) показали, что штаммы аэромонад, выделенные из воды и ила, обладают более низкой вирулентностью. Так, при внутрибрюшинном введении в концентрации даже 1012 микробных клеток они не вызывали гибели рыб, в то время как штаммы, выделенные из организма больных рыб, вызывали клинические признаки и гибель рыб в концентрации 104 – 105 м. к. При этом установлено что, в процессе хранения у музейных штаммов резко снижается вирулентность, и для ее восстановления требуется значительное количество пассажей через организм рыб (L. Buza, 1975).

Первые работы по изучению антигенной структуры и серологической типизации патогенных штаммов А. hydrophila проведены в Центральной лаборатории по изучению болезней рыб ВИЭВ. При этом выделены 4 серотипа этой бактерии, которые и были признаны основными возбудителями, обусловливающими неблагополучие прудовых хозяйств и естественных водоисточников по аэромонозу карпов (А.И. Канаев, 1975; К.А. Лобунцов, Н.И. Рудиков, 1979).

Некоторые авторы считают, что высоковирулентные виды аэромонад как облигатные патогены встречаются довольно редко, а основную роль в возникновении аэромоноза играет группа условно патогенных аэромонад с приобретенной или индуцированной вирулентностью, приобретающих эти свойства в результате воздействия определенных факторов внешней среды или пассирования через организм рыб (Л.Н. Юхименко и др., 1997; 1998; 2001). А поскольку аэромонады в воде рыбоводных прудов присутствуют всегда и являются одним из компонентов микробиоценоза воды, то отрицательное влияние факторов внешней среды (нарушение санитарно-гигиенического режима в прудах, воздействие стресс-факторов, неудовлетворительное качество кормов и др.), по их мнению, приводит к снижению общей резистентности организма рыб, повышению бактериальной обсемененности воды, контаминации органов и тканей рыб и в итоге клиническому проявлению аэромонадной инфекции.

В последнее время отмечается тенденция к повышению уровня заболеваний, этиологическими агентами которых являются ассоциации в основном грамотрицательных микроорганизмов (аэромонад, псевдомонад, энтеробактерий и др.) (Л.Н. Юхименко, Л.И. Бычкова, 2007). Исходя из этого, авторы предлагают выделить их в отдельное заболевание и называть его бактериальной геморрагической септицемией (БГС). Следовательно, согласно последним данным литературы среди аэромонозов рыб выделяют две группы заболеваний. К первой группе относится специфический аэромоноз (краснуху) карпов, обусловленный вирулентными штаммами А. hydrophila и частично другими патогенными видами аэромонад (A. sobria). Вторую группу составляют неспецифические аэромонозы или БГС, вызываемые условно патогенными аэромонадами или их ассоциациями с другими бактериями. Они могут возникать на фоне резкого снижения резистентности организма рыб под воздействием неблагоприятных зоогигиенических условий, загрязнения водоемов, нарушений технологии выращивания рыб и других факторов.

Как видно из анализа приведенных литературных источников, аэромонозы рыб имеют сложную этиологическую структуру. Однако, следует подчеркнуть, что ведущую роль в их этиологии играют патогенные штаммы определенных видов аэромонад, обладающие генетически обусловленными вирулентными свойствами. Так, установлено, что факторами вирулентности аэромонад являются адгезины, экзотоксины (гемолизины, энтеротоксины), специфические ферменты, обеспечивающие защиту внедрившихся микроорганизмов от действия иммунной системы хозяина.

Вирулентные аэромонады отличаются высокой степенью инвазивности (инфективности) за счет наличия у них выраженных адгезивных свойств и способности проникать не только через тканевые барьеры, но и внедряться в эпителиальные клетки (K.Y. Leung a. o., 1996; Н.А. Соколова и др., 2000; И.П. Иренков, М.Н. Борисова и др., 2001).

Адгезины у аэромонад являются атрибутом приспособления к условиям окружающей среды и необходимы для запуска инфекционного процесса патогенными бактериями (В.В. Шимко, Л.Н. Широгорова, 1991; Н.И. Вовк, 2007). Опыты, проведенные В.В. Шимко и Л.Н. Широгоровой (1991), показали, что способность к агглютинации эритроцитов лошади, барана, морской свинки, белой крысы и хомяка выявлена у всех штаммов аэромонад, выделенных от больных рыб. При этом, 90% исследуемых штаммов гемолизировали нативные эритроциты этих животных. При хранении на искусственных питательных средах аэромонады теряли способность к агглютинации эритроцитов животных. А при пассировании их через организм чувствительных рыб реизоляты аэромонад приобретали способность к гемагглютинации.

Для аэромонад, в частности, для A. hydrophila характерно образование экзотоксинов – аэролизина (гемолизина), цитотоксина (дермонекротизина), холероподобного энтеротоксина Азао и эндотоксинов – гемолизина I и II (T. Wadström et al., 1976; М.В. Далин, Н.Т. Фиш, 1980; В.И. Покровский и др., 1999). В пользу токсинообразования у A. hydrophila, A. sobria, A. caviae, A. trota, выделенных из организма людей, животных, объектов внешней среды, говорят результаты исследования ряда зарубежных авторов (B. Acosta et al., 1991; D.V. Singh, S.C. Sanyal, 1992, 1997; J. Andziak et al., 1992; M.O. Efuntoye, 1995; S.B. Baloda et al., 1995; J. Vadivelu et al., 1995 и др.).

К.А. Лобунцовым (1968, 1986) изучалась токсигенная способность A. hydrophila с различной степенью патогенности и свойства вырабатываемого ею токсина, полученного путем фильтрования культур через мембранные фильтры. При этом было установлено, что аэромонады при культивировании на питательных средах способны образовывать экзотоксин, обладающий летальным, желатинолитическим, лецитинолитическим, гемолитическим действием на эритроциты карпа, кролика, крупного рогатого скота и барана, цитотоксическим действием при внутривенном введении карпам и белым мышам. Токсин имеет антигенную природу; в организме кроликов в ответ на его введение образуются антитела, обладающие нейтрализующей способностью в отношении его гемолитического и цитотоксического действия.

Исследования, проведенные В.Ф. Борисенко (1991), свидетельствуют, что степень дезоксирибонуклеазной активности аэромонад, выделенных от больных рыб, находится в прямой зависимости от способности вызывать патологический процесс. Вирулентные аэромонады, обладающие ДНК-азной активностью, выделенные из патологического материала от рыб с признаками острого течения болезни, постоянно дают положительный результат при постановке биопробы на карпах. В то же время, аэромонады, выделенные от клинически здоровых рыб и из воды, также обладающие высокой ДНК-азной активностью, не всегда вызывают гибель рыб или развитие клинических признаков (положительный результат около 70% случаев) (Л.Н. Юхименко и др., 2001). Л.И. Слынько с соавторами (1986) установлено, что при остром течении корреляция между количеством положительных биопроб и положительной реакцией чистых культур микробов на ДНК-азном агаре была выражена в 80% случаев. У рыб с хронической формой число совпадений составило 62,5%, разные результаты составили 12,5% и сомнительные – 25%. Несмотря на то, что ДНК-азная реакция не дает 100% совпадения, при отсутствии возможности постановки биопробы ее можно использовать с целью определения вирулентности выделенных бактерий при остром и хроническом течении аэромоноза.

Считается, что наиболее распространенными видами, изолируемыми из рыб, являются A. hydrophila, A. sobria и A. caviae, для определения которых ранее использовались только биохимические методы. Однако, благодаря наличию современных генетических методов идентификации, в частности ПЦР, появляется возможность более точно устанавливать видовую принадлежность аэромонад и выявлять у них факторы вирулентности (гемолизины, липазы, протеазы, ДНК-азы) (N. Borrell et al., 1997; M.J. Figueras et al., 2000; L. Soler et al., 2002). Например, по данным G. Castro-Escarpulli с сотр. (2003) при использовании этих методов установлено, что бóльшая часть аэромонад, выделенных из замороженной тиляпии Oreochromis niloticus niloticus, реализуемой на рынках Мексики, определялась как A. salmonicida (67,5%) и A. bestiarum (20,9%). А остальные виды в незначительных количествах принадлежали к A. veronii (5,2%), A. encheleia (3,9%) и A. hydrophila (2,6%). К сожалению, в нашей стране эти методы не разработаны и практически не используются.

В связи со сложной и недостаточно изученной антигенной структурой возбудителей лабораторная диагностика аэромонозов представляет определенные трудности. Поэтому она осуществляется комплексно на основании клинико-анатомических признаков, эпизоотологических данных, результатов общих методов бактериологических исследований и определения патогенности аэромонад по ДНК-азной активности и в биопробах на восприимчивых рыбах. Это зачастую сильно затрудняет своевременную постановку окончательного диагноза, оценку эпизоотической ситуации и проведение оздоровительных мероприятий.

С целью ликвидации аэромоноза карпов на неблагополучные хозяйства накладывают карантин и в зависимости от структуры и экономических возможностей для оздоровления хозяйства применяют летование или комплексный метод. Последний включает в себя наряду с проведением ветеринарно-санитарных мероприятий поочередное летование прудов, дезинфекцию ложа прудов, гидротехнических сооружений, спецодежды, инвентаря, тары, создание благоприятных условий среды и кормления, формирование иммунного стада, лечение рыб с широким применением антибактериальных препаратов (Сб. инстр. по борьбе с бол. рыб, 1998).


Каталог: share
share -> 15-й международный медицинский форум «качество и безопасность оказания медицинской помощи» нижегородская ярмарка россия, Нижний Новгород
share -> 1 описание компьютерного манипулятора, позволяющео оценить функциональные возможности пользователя или осуществить донозологическую диагностику 2
share -> Особенности обучения и воспитания детей с нарушениями функций опорно-двигательного аппарата
share -> Общие гуманитарные и социально-экономические дисциплины
share -> Особенности обучения и воспитания детей с нарушениями опорно-двигательного аппарата


Поделитесь с Вашими друзьями:
  1   2   3   4   5   6   7   8


База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2017
обратиться к администрации

    Главная страница