В редакцию журнала



страница209/319
Дата03.03.2020
Размер5.59 Mb.
ТипРуководство
1   ...   205   206   207   208   209   210   211   212   ...   319
Принцип метода. Мочевая кислота определяется в безбелковых фильтратах сыворотки крови по интенсивности синей окраски, развивающейся при восстановлении фосфорновольфрамого реактива.

Техника выполнения работы.

В центрифужные пробирки вносят 1 мл сыворотки крови, добавляют 8 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 0,35М серной кислоты, перемешивают. Затем добавляют 0,5 мл 10% раствора вольфрамата натрия, опять переемешивают и через 10 мин. Центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин. После осаждения белков сыворотки крови центрифугированием ставят опытную, стандартную и контрольную пробы.



Опытная проба: 3 мл надосадочной жидкости переносят в чистую прбирку.

Стандартная проба: 3 мл 0,03М стандартного раствора мочевой кислоты (1 мл содержит 0,006 ммоль мочевой кислоты) налить в чистую пробирку.

Контрольная проба: В чистую пробирку прилить 3 мл дистиллированной воды.

Во все три пробирки добавляют 1,5 мл 10,3% раствора карбоната натрия, 1 мл фосфорновольфрамового реактива, тщательно перемешивают и через 30 мин опытную и стандартную пробы фотометрируют при длине волны 590-700 нм (красный светофильтр) в кювете длиной оптического пути 1 см против контрольной пробы.



Расчет: концентрацию мочевой кислоты рассчитывают по формуле:

С= Еопыт.станд.×Естанд.×10, где

С – концентрация мочевой кислоты, ммоль/л;

Еопыт. – экстинкция опытной пробы;

Естанд.- экстинкция стандартной пробы;

Сстанд. – концентрация стандартного раствора мочевой кислоты,

0,03 ммоль/л;

10 – коэффициент пересчета на объём сыворотки крови.





Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   205   206   207   208   209   210   211   212   ...   319




База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2020
обратиться к администрации

    Главная страница