В редакцию журнала


Клинико-диагностическое значение



страница265/319
Дата03.03.2020
Размер5.59 Mb.
ТипРуководство
1   ...   261   262   263   264   265   266   267   268   ...   319
Клинико-диагностическое значение. Активность альдолазы в сыворотке крови увеличивается при инфекционном гепатите, токсических поражениях печени и некоторых других заболеваниях.

Работа №4. Количественное определение активности каталазы крови методом А.Н. Баха и С.Р. Зубковой.

Принцип метода. Метод основан на титровании избытка перекиси водорода, нерасщепленного каталазой, перманганатом калия в кислой среде.

2О2 + 2КМnО4 + 3Н24 → 8Н2О + 5О2 + К24 + 2MnSО4

Активность каталазы выражается каталазным числом, которое представляет собой количество перекиси водорода в миллиграммах, разложенной 1 мл3 крови за 30 минут. Показателем каталазы называют соотношение каталазного числа к количеству миллионов эритроцитов в 1 мкл исследуемой крови.

Ход работы. С помощью микропипетки берут кровь из пальца человека или хвоста/уха экспериментального животного и готовят гемолизат крови, разводя ее в 1000 раз в мерной колбе (0,1 мл в 100 мл дистиллированной воды).

В 2 колбочки или широкие пробирки отмерить по 7 мл дистиллированной воды и по 2 мл 1% раствора пероксида водорода. В опытную колбу/пробирку прилить 1 мл разведенной в 1000 раз крови. Обе колбы/пробирки – опытную и контрольную – оставить на 30 минут при комнатной температуре. По истечении указанного времени в обе пробы добавить по 3 мл 10 % раствора серной кислоты, которая прекращает действие каталазы. Содержимое опытной и контрольной проб оттитровать 0,1 н раствором перманганата калия до слабо-розового цвета.



Расчет. Допустим, что на титрование опытной пробы пошло 4,5 мл 0,1 н раствора КМnО4, а контрольной – 12,6 мл 0,1 н раствора КМnО4. 0,1 н раствора КМnО4 соответствует 1 мл 0,1 н Н2О2, а 1 мл Н2О2 соответствует 1,7 мг Н2О2. Следовательно, в данном случае каталазное число соответствует: (12,6 – 4,5) × 1,7 = 13,77 единиц.




Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   261   262   263   264   265   266   267   268   ...   319




База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2020
обратиться к администрации

    Главная страница