В редакцию журнала



страница267/319
Дата03.03.2020
Размер5.59 Mb.
ТипРуководство
1   ...   263   264   265   266   267   268   269   270   ...   319
Принцип метода. Метод основан на окислении индигокармина кислородом, выделяющемся при разложении перекиси водорода под влиянием пероксидазы. Активность фермента измеряется временем, необходимым для окисления индигокармина, который меняет окраску от сине-зеленого в желто-розовый цвет. Чем меньше время окисления, тем выше активность фермента.

Ход работы. В пробирку налить 2 мл 0,1 М ацетатного буфера рН 4,7, прибавить 3 мл разбавленной в 1000 раз крови (см. работу 2), 2 мл дистиллированной воды и 1 мл 0,001% раствора индигокармина. Содержимое пробирки тщательно перемешать и быстро внести в нее 2 мл 0,2 % раствора Н2О2. В момент внесения Н2О2 засечь по секундомеру время и зафиксировать время перехода сине-зеленой окраски в желто-розовую.

Расчет. Пероксидазное действие крови связано с количеством гемоглобина, количество которого у разных людей отличается, поэтому определяется индекс пероксидазной реакции. Это отношение времени окисления индигокармина, к процентному содержанию гемоглобина в крови, умноженное на 100%.

Примерный расчет. Допустим, что переход окрашивания жидкости произошел за 8 секунд, а количество гемоглобина в исследуемой крови составляет 80% (160 г/л гемоглобина принято принимать за 100%); следовательно, индекс пероксидазной активности будет равен:

8 сек × 100% = 10

80%

В норме пероксидазная активность крови колеблется от 30 до 50 секунд.




Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   263   264   265   266   267   268   269   270   ...   319




База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2020
обратиться к администрации

    Главная страница