В редакцию журнала


Работа № 2. Количественное определение свободного оксипролина в моче



страница288/319
Дата03.03.2020
Размер5.59 Mb.
ТипРуководство
1   ...   284   285   286   287   288   289   290   291   ...   319
Работа № 2. Количественное определение свободного оксипролина в моче.

Принцип метода. Метод основан на окислении гидроксипролина пероксидом водорода в присутствии ионов меди (II) в щелочной среде до пиррола. Пиррол образует розовое окрашивание с парадиметиламинобензальдегидом в кислой среде. Интенсивность окрашивания раствора пропорциональна концентрации оксипролина.

Ход работы. В две пробирки (контроль и опыт) отмерить по 1 мл профильтрованной мочи, добавить по 1 мл 0,01 М раствора сернокислой меди, по 1 мл 2,5 М раствора NaOH и по 1 мл 6% раствора пергидроля. После перемешивания обе пробирки поместить на 10 мин в водяную баню при 70оС и периодически помешивать. Пробы охладить в воде со льдом (снегом), добавить в каждую пробирку по 4 мл 3 н раствора серной кислоты и по 2 мл реактива Эрлиха (5% раствор п-диметиламинобензальдегида в пропаноле или изопропаноле). Контроль оставить в воде со льдом, опыт нагреть до 100оС и кипятить в течение 80 сек. В опытной пробирке развивается розовое окрашивание. Содержимое обеих пробирок колориметрировать на ФЭКе при зеленом светофильтре в кюветах на 10 мм. Из экстинкции опыта вычесть экстинкцию контроля и по калибровочному графику найти содержание оксипролина в 1 мл мочи. Вычисляют количество оксипролина в 100 мл или суточном количестве мочи.

Норма. У взрослого человека с мочой за сутки выводится до 8 мг свободного оксипролина.




Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   284   285   286   287   288   289   290   291   ...   319




База данных защищена авторским правом ©zodorov.ru 2020
обратиться к администрации

    Главная страница